简陋的设备,零星的材料,想要合成当代最顶尖的药物,其难度可想而知。
但是,这些困难在王奕的面前,简单的就像一个一“一”样。
或许王奕的情商不高,人系交往较差,但是在科研这方面,绝对领先于这个时代。
想要制备脂质体阿霉素,先得有阿霉素。
阿霉素一般是由链霉菌属的多种菌株产生。
如果要是去制造阿霉素,那难度实在是太大了,最起码连那些霉菌都搞不定。
像波赛链霉菌、浅兰浅红链霉菌、加利利链霉菌、灰色链霉菌、灰浅红链霉菌等霉菌,一般人听都没听说过,更没有见过。
若是没有简易的方法,这个实验根本就没法进行。
但这一切根本就难不到王奕。
在定下这个治疗方案之后,王奕已经想到了阿霉素的来源。
阿霉素是常规治疗癌症的药物,想要得到阿霉素,可以从癌症药物之中提取。
范伊菲自从得了癌症之后,别的或许没有买,抗癌药物买的倒是不少。
在离开家的时候,王奕拿了一瓶14-羟基柔红霉素,就像提取姜黄素一样,从14-羟基柔红霉素中轻轻松松就将阿霉素提取了出来。
提取阿霉素之后,困难才真正开始。
王奕要把阿霉素制成脂质体,困难可不是一般的大啊。
首先,王奕要准备材料跟设备。
所需的材料为:阿霉素、胎牛血清、卵磷脂、胆固醇、DPPC、DOPE、DSPE、PEG、四甲基偶氮唑盐、二甲基亚砜。
所需的设备为:培养板、透析袋、聚碳酯膜、酶标仪、荧光光度计、聚碳酯膜过滤器。
还好,在刘志强的车间里,除了胎牛血清,剩下的材料跟设备全都有。
没有胎牛血清,王奕可以用自己的血清,人类血清在进行实验的时候,要比胎牛血清强得多了。
而且王奕是范伊菲的儿子,两个人的基因有一半相似,在王奕的血清里培养好的药物,进入到范伊菲的身体之后,不会有任何排斥。
王奕是一个狠人,毫不犹豫,直接就划破了自己的胳膊,流出来了300毫升鲜血。
刘志强站在一边,看到这一幕,头皮都有点发麻了。
他虽然天天搞氨基酸,但却不跟血肉打交道,看到王奕流出来了这么多血,心里还有点发抖呢。
“小奕,你……你没事儿吧?”
“没事儿,若是处理得当,伤口很快就会愈合了!”
王奕很淡定的说了一句,然后处理了一下伤口,把鲜血放到冰箱里面冷藏,紧接着便投入到了实验当中。
王奕采用经典的薄膜分散法制备空白阿霉素脂质体。
第一步,分别称取处方量的20mmol卵磷脂、29mmol胆固醇、10mmolDPPC、40mmolDOPE和1mmolPEG,置于茄瓶中加入适量氯仿溶解。
第二步,超声30s使其充分混合均匀。
第三步,用旋转蒸发仪减压浓缩除去氯仿,经40度真空干燥。
第四步,加入适量250mmol/L硫酸铵溶液将脂膜水化。
第五步,充氮气,在50C水浴中温育、超声。
第六步,采用硫酸铵梯度法载入阿霉素,取脂质体悬浮液10mL置于透析袋中,在磷酸盐缓冲液中进行透析。
第七步,脂质体囊泡经过聚碳酯膜挤压后形成带有硫酸铵梯度的空白单室脂质体。
第八步,在调节至10mg/mL的空白脂质体中逐滴加入含1mg/mL阿霉素的水溶液,使药脂比为10:1,混匀,水浴40度孵育20min,即得阿霉素脂质体。
上述这些实验,每一个步骤都是要花时间的,等王奕成功合成阿霉素脂质体的时候,已经是上午6点了。
一晚上没有合眼,王奕的确是有点困了,但一想到马上就能够根治母亲的病了,王奕瞬间就像是打了鸡血一样兴奋。
现在只剩下最后一步了,也是最关键的一步。
王奕把昨天晚上放到冰箱里冷藏的血液拿了出来,此时血液的血清跟血浆已经分离了。
王奕把血清提取了出来,然后将姜黄素跟刚刚合成的脂质体阿霉素按照一定的比例,混入到了自己的血清当中。
紧接着将配置好的血清放到pH为7.4的PBS缓冲液中透析,并于37度的恒温振荡器中振荡。
两个小时后,血清、姜黄素与脂质体阿霉素完全融合。
王奕又用荧光光度计测定合成血清的荧光强度,确保不会出现任何问题。
这个时候马上到上午8点了,工厂里面的工人已经陆陆续续的来到了院子里。
刘志强经过一夜的实验,实在是熬不住了,不知道在什么时
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